化妝品檢測-防腐挑戰(zhàn)試驗

防腐挑戰(zhàn)試驗，又稱微生物挑戰(zhàn)性試驗，是通過人為向化妝品樣品中接種特定種類、一定數(shù)量的微生物，模擬產(chǎn)品在生產(chǎn)、使用過程中可能遭遇的微生物污染場景，在規(guī)定條件下培養(yǎng)后，定期檢測樣品中存活微生物的數(shù)量變化，以此評價產(chǎn)品防腐體系能否有效抑制微生物增殖、保障產(chǎn)品在保質(zhì)期內(nèi)安全穩(wěn)定的試驗方法，是化妝品上市前必須完成的關(guān)鍵檢測項目，也是企業(yè)保障產(chǎn)品質(zhì)量安全的重要手段。

化妝品檢測-防腐挑戰(zhàn)試驗

防腐挑戰(zhàn)試驗步驟

菌液制備：分別培養(yǎng)各試驗菌株，制備菌懸液，細菌菌懸液濃度調(diào)整為10?~10? cfu/mL，真菌(含黑曲霉孢子)菌懸液濃度調(diào)整為10?~10? cfu/mL，制備后2h內(nèi)使用，或2~8℃保存不超過24h(黑曲霉孢子懸液當天使用)。

中和劑鑒定試驗：每種菌株單獨進行，驗證中和劑能有效終止樣品中防腐劑的抑菌作用，確保檢測結(jié)果準確，判定標準為中和后試驗組菌落數(shù)不低于對照組的50%。

樣品接種：無菌條件下，取20~30g(mL)待測樣品，加入不超過樣品體積1%的菌懸液，用渦旋振蕩器混合均勻，每組樣品設(shè)置平行樣及空白對照組(不接種菌液)。

培養(yǎng)與取樣：將接種后的樣品置于22.5±2.5℃恒溫培養(yǎng)箱中保存，分別在接種當天(0天)、第1天、第7天、第14天、第21天、第28天取樣檢測，每次取樣1g(mL)，避免二次污染[4]。

菌落計數(shù)：將取樣樣品用中和肉湯稀釋至適宜倍數(shù)，接種到對應培養(yǎng)基上，細菌在36±1℃培養(yǎng)48h，真菌在28±2℃培養(yǎng)48~72h，按規(guī)范方法計數(shù)菌落數(shù)，記錄數(shù)據(jù)。

判定標準：第7天時菌落總數(shù)下降≥99.9%，第28天時無增長;真菌：第14天時菌落總數(shù)下降≥99.0%，第28天時無增長，判定為防腐效果良好;若未達到上述要求，需優(yōu)化防腐體系后重新試驗。